本書是作者根據(jù)多年微生物實驗教學積累的經(jīng)驗，以凸顯微生物學和微生物實驗技術在工業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)境、食品等各專業(yè)領域的應用為出發(fā)點，為非微生物專業(yè)學生編寫的—本微生物學實驗教材。
  全書分為上、下兩篇，共74個實驗。上篇為基本技能部分，編
寫了39個典型的微生物基本操作技能實驗，內(nèi)容包括光學顯微鏡和顯微技術、細菌染色技術、培養(yǎng)基制備技術、滅菌除菌技術、接種與分離培養(yǎng)技術、生長繁殖測定技術、微生物形態(tài)特征觀察和描述、噬菌體檢測技術、菌種保藏技術和分類鑒定技術；下篇為專業(yè)技能部分，根據(jù)微生物學和微生物學實驗技術在工業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保和食品等領域中的應用，編寫了工業(yè)微生物、制藥微生物、環(huán)境微生物和食品微生物方向共35個應用微生物學實驗，以滿足不同專業(yè)方向學生選擇專業(yè)實驗的需要。與目前其他同類教材相比而言，本書具有實驗內(nèi)容安排組織系統(tǒng)、科學，選編的實驗更加實用、可操作性強、指導性更強的特點。另外為了增加直觀性，改變了以往教材的手繪圖片，書中基本上采用拍攝的真實圖片，以增加直觀教學效果。

  微生物學是生物學中具有一套特有的實驗技術、實驗性很強的一門學科，同時也是一門應用范圍很廣的一門學科，已廣泛應用于工業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)境、食品等多個領域。目前，微生物學不僅僅是微生物學專業(yè)開設的一門重要基礎課，它也已成為與生命科學相關的專業(yè)（如生物工程、生物技術、制藥工程、環(huán)境工程、食品科學與工程等）所開設的一門重要的專業(yè)基礎課，并且這些專業(yè)的規(guī)模日趨增大。但一直沒有一本合適的微生物學實驗教材供非微生物專業(yè)學生、教師使用和參考。為此，我們根據(jù)多年微生物實驗教學積累的經(jīng)驗，以凸顯微生物學和微生物實驗技術在工業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)境、食品等各專業(yè)領域的應用為出發(fā)點，編寫了《微生物學實驗》一書。
  本書在編寫內(nèi)容的組織形式上分成上篇和下篇兩部分。上篇為基本技能部分，安排了39個典型的微生物基本操作技能實驗，內(nèi)容包括光學顯微鏡和顯微技術、細菌染色技術、培養(yǎng)基制備技術、滅菌除菌技術、接種與分離培養(yǎng)技術、生長繁殖測定技術、微生物形態(tài)特征觀察和描述、噬菌體檢測技術、菌種保藏技術和分類鑒定技術。目的是強化學生對基本實驗技能的掌握。在這部分實驗中不僅包括微生物學的經(jīng)典實驗技術，而且也包括了現(xiàn)代技術在微生物實驗中的應用，盡量體現(xiàn)實驗內(nèi)容和實驗手段的先進性；下篇為專業(yè)技能實驗部分，該部分的主要目的是使學生熟悉微生物學課程與其所學專業(yè)的密切關系，了解學習微生物學的重要性。為此，我們根據(jù)微生物學和微生物學實驗技術在工業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保和食品等領域中的應用，編寫了工業(yè)微生物實驗、制藥微生物實驗、環(huán)境微生物實驗和食品微生物實驗四個實驗模塊，共35個應用微生物學實驗，以滿足不同專業(yè)方向學生選擇專業(yè)實驗的需要。實驗內(nèi)容更加突出專業(yè)特色和實用性。雖然按照微生物應用領域編寫了不同專業(yè)方向微生物實驗內(nèi)容，但有些實驗內(nèi)容對其他專業(yè)方向也具有指導作用。
  本書中每個實驗編寫格式與以往教材不同，刪去實驗原理，而以概述形式對實驗背景、原理做了必要的介紹，但并不一定是完整的介紹。因此，要求學生實驗前進行預習，以充分了解所要進行實驗的背景知識、原理和目的，在實驗報告中用自己的語言撰寫在前言部分，改變學生以往寫實驗報告照抄實驗講義的做法。此外，在很多實驗的實驗結果部分設計了大量表格，突出加強培養(yǎng)學生對實驗結果觀察、記錄和整理的能力。在思考題上設計大量的分析思考問題，目的是加強培養(yǎng)學生分析問題的能力。為了增加直觀性，改變了以往教材采用手繪圖片形式，書中基本上采用拍攝的真實圖片，以增加直觀教學效果。
  總體上，本書具有實驗內(nèi)容安排組織系統(tǒng)和科學,選編的實驗實用性、指導性強、可操作性更強的特點，尤其適合作為非微生物專業(yè)微生物學實驗教材。本書中各個實驗相對獨立，因而根據(jù)具體情況可酌情選做。
  本書在編寫過程中得到我院各位領導的關心和支持，得到微生物學課程組老師的幫助和支持，還得到化學工業(yè)出版社趙玉清、袁俊紅等的大力支持和具體指導，另外，本書出版也得到學校教材建設費的資助，在此，謹對他們表示衷心感謝。
  本書涉及的內(nèi)容范圍廣，同時本書的編寫在許多方面都是新的嘗試，限于編者的學識、水平和能力，書中的疏漏和錯誤之處恐仍難免，誠請廣大學生、同行和讀者批評指正，以待日后再版時改進。
編者
2009年10月于南京工業(yè)大學
生物與制藥工程學院

生物與制藥工程學院
微生物實驗室安全1
第1章微生物實驗介紹4
實驗1微生物實驗介紹4
第2章光學顯微鏡和顯微技術8
實驗2普通光學顯微鏡的結構、使用與維護8
實驗3相差顯微鏡的結構與使用12
實驗4微生物測微技術15
實驗5數(shù)碼顯微攝影技術17
第3章細菌染色技術20
實驗6細菌的簡單染色和細菌菌體形態(tài)的觀察20
實驗7細菌的革蘭染色22
實驗8細菌的芽孢染色24
實驗9細菌的莢膜染色25
實驗10細菌的鞭毛染色27
第4章培養(yǎng)基的制備30
實驗11通用培養(yǎng)基的配制30
實驗12選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的配制和應用33
第5章滅菌和除菌技術38
實驗13高壓蒸汽滅菌和滅菌驗證38
實驗14干熱滅菌42
實驗15過濾除菌技術44
第6章微生物接種技術46
實驗16微生物斜面接種技術46
實驗17微生物平板接種技術49
實驗18微生物液體接種技術和穿刺接種技術52
第7章微生物培養(yǎng)技術56
實驗19微生物的純種分離技術56
實驗20厭氧微生物的培養(yǎng)技術59
第8章微生物生長繁殖測定技術63
實驗21微生物顯微鏡直接計數(shù)法——血球計數(shù)板計數(shù)法63
實驗22微生物間接計數(shù)法——平板菌落計數(shù)法65
實驗23細菌生長曲線的測定——比濁法67
實驗24霉菌生長曲線的測定——干重法69
第9章微生物形態(tài)特征觀察和描述72
實驗25細菌的菌體特征和培養(yǎng)特征72
實驗26放線菌的菌體特征和培養(yǎng)特征77
實驗27酵母菌的菌體特征和培養(yǎng)特征79
實驗28霉菌的菌體特征和培養(yǎng)特征83
實驗29藻類形態(tài)的觀察86
實驗30原生動物和微型后生動物的觀察87
第10章噬菌體檢測技術89
實驗31大腸埃希菌噬菌體的分離和純化89
實驗32大腸埃希菌T2噬菌體效價的測定91
第11章微生物菌種保藏技術94
實驗33斜面?zhèn)鞔蜏乇２胤?4
實驗34液體石蠟保藏法96
實驗35冷凍干燥保藏法98
實驗36液氮超低溫保藏法100
第12章微生物分類鑒定技術103
實驗37細菌的生理生化反應——糖發(fā)酵實驗和IMViC實驗103
實驗38利用Biolog自動微生物分析系統(tǒng)進行微生物鑒定107
實驗39利用16S rRNA基因序列分析技術進行微生物分類鑒定112
第13章工業(yè)微生物實驗122
實驗40營養(yǎng)物質對微生物生長的影響——碳源物質的影響122
實驗41環(huán)境因素對微生物生長的影響——pH的影響124
實驗42堿性蛋白酶產(chǎn)生菌的分離篩選126
實驗43大腸埃希菌β半乳糖苷酶合成誘導與調(diào)控128
實驗44紫外線誘變技術131
實驗45抗反饋調(diào)節(jié)突變株的選育134
實驗46氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選136
實驗47酵母菌原生質體融合育種140
實驗48固定化大腸埃希菌生產(chǎn)L天冬氨酸143
第14章制藥微生物實驗147
實驗49環(huán)境中微生物監(jiān)測147
實驗50水質微生物學分析——利用多管發(fā)酵法檢測水中大腸菌群數(shù)量150
實驗51水質微生物學分析——利用膜濾技術檢測水中糞便腸球菌數(shù)量154
實驗52微生物對數(shù)遞減時間(D值)測定155
實驗53藥品微生物限度檢查——細菌、霉菌與酵母菌計數(shù)158
實驗54微生物限度檢查方法的驗證——菌落計數(shù)方法的驗證161
實驗55藥品的無菌檢查——全密封無菌檢驗系統(tǒng)的使用163
實驗56藥品中細菌內(nèi)毒素檢查——鱟試劑(LAL)法166
實驗57消毒劑效力測定——石炭酸系數(shù)實驗168
實驗58微生物制劑檢驗——乳酸菌制劑檢查法170
實驗59抗生素產(chǎn)生菌分離篩選和抗菌譜測定173
第15章環(huán)境微生物實驗177
實驗60活性污泥生物相的觀察177
實驗61活性污泥脫氫酶活性的測定178
實驗62利用發(fā)光細菌檢測水體生物毒性181
實驗63富營養(yǎng)化水體中藻類檢測——葉綠素a法184
實驗64苯酚降解菌的分離篩選186
實驗65利用微生物吸附法去除水體中重金屬188
第16章食品微生物實驗191
實驗66食品中菌落總數(shù)的檢測191
實驗67食品中致病菌的檢測193
實驗68食品中大腸菌群的計數(shù)197
實驗69食品中霉菌毒素的檢測200
實驗70污染食品微生物來源的分析與判斷202
實驗71純種發(fā)酵泡菜的制作204
實驗72酸奶的制作205
實驗73酒釀的制作208
實驗74食藥用真菌的組織分離及原種制作209
附錄211
附錄1實驗用菌種及其學名211
附錄2實驗用培養(yǎng)基211
附錄3染色液和試劑的配制217
參考文獻218